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本期是专栏第10期，小编为大家介绍2项来自徐州医科大学的技术成果，欢迎大家咨询了解哦！
本成果是一种家蝇衍生抗菌肽D26M及制备方法和应用。对家蝇抗真菌肽MAF1A进行氨基酸残基替换和右旋改造获得D26M，使用多肽合成仪进行固相合成多肽，使用反向高效液相色谱进行纯化，最后进行氨基酸分析及质谱鉴定，得到了一种临床抗鲍曼不动杆菌感染的新型药物候选分子。
本发明在保证高抗菌活性的情况下，提高了D26M的稳定性和细胞选择性；D26M具有更强的阳离子性、疏水性以及渗透到病原菌双层膜的能力，具有广谱的抗菌活性及高效抗炎活性，尤其是对多重耐药性鲍曼不动杆菌，对在体内外环境中的游离态鲍曼不动杆菌及其形成的生物被膜均有很好的抗性，且能有效抑制革兰阴性菌外膜LPS的活性。
D26M（B）与其母肽（A）的氨基酸排列螺旋轮及最小抑菌浓度测定
1）MIC浓度下，D26M作用10min时即对鲍曼不动杆菌起杀菌作用，这一速度明显快于临床药物多粘菌素B；同时D26M在12h内具有与多粘菌素B同样长效的抑菌效果。
2）扫描电镜显示D26M通过破坏鲍曼不动杆菌细胞膜而发挥其杀菌效应，且破膜效应更强于多粘菌素B。
3）D26M能显著抑制LPS诱发巨噬细胞炎症因子IL1β和TNFα分泌的能力。
联系方式：0511-82010055 18118406566（张老师）
本发明提供了一种正戊型肝病毒属基因C1 型病毒ORF2重组蛋白及其制备方法和应用，属于 戊型肝炎病毒技术领域，本发明提供的大鼠HEV C1 ORF2重组蛋白，能够最大限度地保留大鼠HEV的免疫原性；所述重组蛋白能够刺激不同物种动物产生特异性抗体。免疫该蛋白的大鼠血清中产生的针对HEV C1 ORF2的特异性抗体能有效阻断HEVC1 ORF2病毒样颗粒与大鼠肝癌细胞RH35的特异性结合，证实所述重组蛋白能够用于制备HEVC1疫苗。
大鼠HEV能够感染人类，具有人畜共患的特征。由于HEVA与HEVC1亲缘关系较远，其ORF2的同源性仅为50％～60％，提示人ORF2与大鼠ORF2的免疫原性相差较大，因而人HEV的ORF2蛋白与大鼠HEV感染人体之后产生的针对ORF2的抗体之间的交叉反应性较小，不能用于检测感染大鼠HEV的病人的血清样本，也不能应用于研发大鼠HEV的疫苗。综上所述，研发大鼠HEV的ORF2的重组蛋白对大鼠HEV的检测手段和疫苗制备等防治策略至关重要。
HEVA感染病人产生的抗体特异地与HEVA ORF2相互作用，而不与HEVC1 ORF2重组蛋白相互作用。该实验证明，以HEVC1 ORF2重组蛋白不能够检测HEVA戊型肝炎病毒感染的病人，该蛋白可以用来建立ELISA方法对人感染HEVC1型病毒进行诊断。
免疫HEVC1 ORF2重组蛋白免疫的大鼠血清中产生的针对HEVC1 ORF2的特异性抗体能有效阻断HEVC1 ORF2病毒样颗粒与RH35细胞的特异性结合，而未免疫大鼠血清、免疫HEVA ORF2蛋白的大鼠血清无阻断效果。证实免疫HEVC1 ORF2重组蛋白免疫的大鼠血清中产生了具有保护活性的抗体，可阻断HEVC1入侵宿主细胞，HEVC1 ORF2重组蛋白可作为一种有效的候选疫苗，而免疫HEVA ORF2蛋白产生的抗体对大鼠HEV无交叉保护活性。
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